血凝仪的使用,为临床提供了血栓与止血的众多参数,促进了血栓与止血实验诊断水平的提高。为保证给临床诊断、治疗、监测病情及预后评估等提供zui为可靠、zui为准确的数据。现就标本采集、制备、运输、抗凝剂的选择等注意事项即分析前质量控制做一综述。
1 标本的采集
1.1 防止组织损伤(外源因子进入) 采血应“一针见血”以防止组织损伤和外源性凝血因子进入针管[1]。用注射器取血时,如果抽血过慢或不太顺利,可能激活凝血系统,实验结果将会显示凝血因子活性增高、血小板数假性降低等异常结果,采血用品推荐使用真空采血系统。
1.2 尽快送检 一般血液采集时,进入容器到进行实验所用时间越短,所被分析的凝血因子被保护得越好。
1.3 避免从输液管取血 从输液三通管取血的做法不可取。因为采取的样品常含小凝血块及污染的组织液,有时尚可混有经此途径给予的药物,比如肝素返流在样品中,导致凝血时间不应有的延长。
1.4 取血因素 取血时的压力,时间长短可影响局部血液的浓缩、纤溶活性(t-PA)、血小板释放、某些凝血因子活性(Ⅷ因子)。
2 抗凝剂的选择
2.1 推荐枸橼酸钠 钙的快速螯合剂,能有效阻止Ⅴ和Ⅷ的降解,并可稀释血浆和血液,但需要严格按1∶9比例抗凝。但若标本血的HCT异常增高或异常减低时,可用公式:抗凝剂用量=0.00185×血量(ML)×(100-患者HCT)矫正[2]。
2.2 缓冲抗凝剂 作用是维持血浆恒定的pH,防止易变因子失活,zui常用的缓冲剂是羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸。
2.3 抗凝剂联合抗聚集剂 枸橼酸钠不能*抑制血小板活化,活化的血小板含释放一些产物如:PF4、βTG、VWF和纤溶酶原激活抑制剂,所以这些因子的定量及纤溶系统的检测选用抗凝剂联合抗聚集剂,通常用CTAD液(枸橼酸钠0.11 mmol/L,茶碱15 mmol/L,腺苷3.7 mmol/L和潘生丁0.198 mmol/L)肝素治疗监测也需要CTAD抗凝,因活化血小板释放PF4能中和肝素。
2.4 抗凝剂联合抗纤溶剂 在溶栓治疗监测时,普通抗凝剂抗凝会使纤溶系统持续活化,而使纤维蛋白原及其降解产物的定量产生误差,应该使用有抗凝作用的抑肽酶可抑制纤溶活化,更能准确测定纤维蛋白原,但可引起TT延长。
3 试剂的选择
根据仪器选择合适的试剂,如光电检测法凝血仪不宜选择透光差的试剂;PT检测时应选择ISI值低的试剂。
4 标本的运输
在实验室内采血,或尽快送至检测地点,严防剧烈振动,日光直射和异物落入;标本需室温下运送,低温会损伤血小板,至使因子Ⅵ、Ⅺ活化,使APTT和PT缩短。但是有些项目(如β血小板球蛋白、血小板因子Ⅳ和凝血因子等)需要在4 ℃下运送,以防止因子Ⅴ和Ⅲ降解;真空采血系统的真空管均带有管塞,避免运送过程中标本的污染,保证医护人员的安全。真空管的管塞可以防止因CO2散失而导致的pH值改变。综上所述,血栓与止血实验检查的质量控制对检验结果的准确可靠起着举足轻重的作用。只有正确地掌握这些因素,才能得出的数据,从而更好地服务于临床。