在国产elisa试剂盒检测实验中，zui让大家关注的往往是一些操作技巧、步骤、保存、注意事项，其实只要这些方面做好了之后基本就没有什么问题了。但是也有客户反映，为什么我每一步都按照要求去做还是没有做好呢？这就很可能是操作细节的问题了。大家整理出一份ELISA实验的细节优化方案，这些ELISA优化是否在您的重点思虑范围之内呢？

一、包被原的性质

    1.亲和素生物素：先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。

    2.脂类物质：可将其在有机溶剂中溶解后加入ELISA板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质自然干固在固相表面。

    3.小分子必须依靠和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。
 

二、包被液的选择

    一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。上海恒远提醒应当注意，由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下zui终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液，还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。