α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)检测试剂盒(速率微板法)注意事项:
1,底物请避光保存。
2,严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
3,所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
4,本试剂不同批号组分不得混用。
5,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)检测试剂盒(速率微板法)操作步骤:
1, 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)。
2,加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3,温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4,配液:将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。
5,洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6,加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7,显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
8,终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9,测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。