技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 羊亚洲I型口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒实验操作步骤
羊亚洲I型口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒实验操作步骤
更新时间:2020-03-04   点击次数:1123次

羊亚洲I型口蹄疫抗体(FMD-I)ELISA检测试剂盒操作步骤

1.  编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1

孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.  加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先

加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不

触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.  温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.  配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6.  加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

7.  温育:操作同 3。 

8.  洗涤:操作同 5。

9.  显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10.  终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。  测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。

 

化工仪器网

推荐收藏该企业网站
Baidu
map