使用PCR检测试剂盒时需要注意哪些要点?
PCR检测试剂盒用于检测疑似感染动物的血清或组织中的CSFV,适用于CSFV的检测、诊断和流行病学调查。该试剂盒不能用于区分强弱毒。
PCR检测试剂盒需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、PCR扩增仪、电泳仪、电泳槽、紫外凝胶成像仪(或紫外分析仪)、微波炉、组织研磨器、-20°C冰箱、可调移液器(2H儿、204、200凡、1000风)。
2.耗材:眼科剪、眼科镊、称量纸、20mL-次性注射器、生理盐水、琼脂糖、500mL量简、500mL锥形瓶、经焦碳酸二乙酯(DEPC)水处理的灭菌1.5mL离心管和吸头(10风、200HL、1000儿)、灭菌双蒸水。
PCR检测试剂盒的使用注意事项:
1.所有接触病料的物品均应合理处理,以免污染实验室。
2.PCR整个试验分配液区、模板提取区、扩增区、电泳区。流程顺序为配液区模板提取区扩增区电泳区。严禁器材和试剂倒流。
3.所有试剂应在规定的温度储存,-20"C保存的各试剂使用前应放于室温*融化,使用后立即放回-20°C。
4.染色液低毒,应于室温条件避光保存,操作时应戴上手套。
5.注意防止试剂盒组分受污染。使用前将红盖管8000rpm离心15s,使液休全部沉于管底,放于冰盒中,吸收液体时移液器吸头尽较在液体表面层吸取。
6.不要使用超过有效期限的试剂,试剂盒之间的成分不要混用。
7.在RNA提取过程中,避免RNA酶污染,尽量缩短操作时间。
8.严格遵守操作说明可以获得较好的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须准确。
9.反复冻融试剂将减低检测灵敏度儿建议在3次内用完,请严格按试剂金说明书操作。