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柠檬酸(CA)含量测定样本的前处理
更新时间:2021-08-26   点击次数:817次

柠檬酸(CA)含量测定样本的前处理:

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:

①称取约0.1g组织或收集500万细菌或细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆 器或研钵匀浆。

②将匀浆600g,4℃离心5min。

③弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。

④上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的α-KGDH(此步可选做)。

⑤在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超声3秒,间隔10秒,重复30次),用于线粒体α-KGDH活性测定。

测定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶A生成琥珀酰辅酶A、二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自备实验用品及仪器:紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶DYRK2抗体

锌指结构蛋白酶20抗体

C型凝集素受体CLEC13A抗体

双甲基精氨酸水解酶2抗体

D酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体

双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶3抗体

肌营养蛋白α抗体

多巴胺β羟化酶抗体

抑癌基因抗体

DNA甲基转移酶1抗体

DNA甲基转移酶-3α抗体

DNA甲基转移酶-3β抗体

死亡受体3抗体

死亡受体4抗体

精神分裂症易感基因抗体

蓬乱蛋白1抗体

异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗体

结蛋白抗体

DISC1 C端抗体

DISC1 N端抗体

多能发育相关基因2抗体

结肠直肠癌缺失基因抗体

多巴胺脱羧酶抗体

防御素β1/Defensin β1抗体

DLX4抗体

DTX1抗体

丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体


 

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