技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒操作步骤
人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒操作步骤
更新时间:2021-09-07   点击次数:645次

人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

大鼠toll样受体3(TLR3)ELISA Kit

大鼠toll样受体1(TLR1)ELISA Kit

大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA Kit

大鼠Tau蛋白ELISA Kit

大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)ELISA Kit

大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA Kit

大鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA Kit

大鼠信号转导分子1(Smad1)ELISA Kit

大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)ELISA Kit

大鼠S100-A5蛋白(S100A5)ELISA Kit

大鼠Rho相关GTP结合蛋白RhoE ELISA Kit

大鼠Rho鸟苷酸交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)ELISA Kit

大鼠Ras相关蛋白Rab-11A ELISA Kit

大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit

大鼠P27蛋白(P27)ELISA Kit

大鼠P21蛋白(P21)ELISA Kit

大鼠P0蛋白抗体(IgG)ELISA Kit

大鼠P0蛋白(p0)ELISA Kit

大鼠N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2 ELISA Kit

大鼠NOGO-A ELISA Kit

大鼠Na-K-ATP酶ELISA Kit

大鼠NAD(P)H脱氢酶(醌)1(NQO1)ELISA Kit

大鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA Kit

大鼠L-乳酸脱氢酶(L-LDH) ELISA Kit

大鼠KiSS-1受体(KISS1R)ELISA Kit

大鼠KI-67 ELISA Kit

大鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)ELISA Kit

大鼠I型胶原(COL1)ELISA Kit

大鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)ELISA Kit

大鼠GTP酶 KRas ELISA Kit

大鼠Ghrelin受体(Ghsr)ELISA Kit

大鼠F-肌动蛋白ELISA Kit

大鼠FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1)ELISA Kit

大鼠ERp57 ELISA Kit

大鼠E3-RSIκB ELISA Kit


 

化工仪器网

推荐收藏该企业网站
Baidu
map