小鼠17羟皮质类固醇elisa检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠胸腺活化调节趋化因子(mouse TARC)

小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(mouse TAT)

小鼠组织因子(mouse TF)

小鼠组织因子抑制物(mouse TFPI)

小鼠转化生长因子-β1(mouse TGF-β1)

小鼠转化生长因子-β2(mouse TGF-β2)

小鼠可溶性粒细胞靶受体(mouse sTREM-1)

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)

小鼠Toll样受体-2(mouse TLR-2)

小鼠Toll样受体-4(mouse TLR-4)

小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-1(mouse TIMP-1)

小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-2(mouse TIMP-2)

小鼠肿瘤坏死因子-a(mouse TNF-a)

小鼠肿瘤坏死因子-b(mouse TNF-b)

小鼠肿瘤坏死因子-r(mouse TNF-r)

小鼠组织纤溶酶原激活剂(mouse t-PA)

小鼠转铁蛋白(mouse Transferrin)

小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse TSLP)

小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)

小鼠可溶性肿瘤坏死因子-a受体(mouse sTNF-aR)

小鼠组织多肽抗原(mouse TPA)

小鼠血小板生成素(mouse TPO)

小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(mouse TRAIL/APO 2L)

小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(mouse TRAIL R1)

小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)

小鼠血栓调节蛋白(mouse TM)

小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(mouse uPA)

小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(mouse uPA-R)

小鼠血管细胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)

小鼠血管内皮生长因子(mouse VEGF)

小鼠血管内皮细胞生长因子B(mouse VEGF-B)

小鼠血管内皮细胞生长因子C(mouse VEGF-C)