1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
ADAR1 (N-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(N端)
AMPK alpha 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
ADK腺苷酸激酶抗体
A2ML1α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1
3-Apr细胞凋亡相关蛋白3抗体
Actin肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
ABCB7ATP结合蛋白家族7抗体
ASCL2ASCL2蛋白抗体
phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化转录因子1抗体
phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化复制因子2抗体
ATF5活化转录因子5抗体
ATF6 beta活化转录因子6β抗体
ATICAICAR甲酰基转移酶抗体
phospho-ATM (Ser794)磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ATP5EATP5E蛋白抗体
ATP5G2ATP5G2蛋白抗体
ATP6V0D2ATP6V0D2蛋白抗体
ATP6V1B2ATP6V1B2蛋白抗体
ATPIF1ATPIF1蛋白抗体
AttractinAttractin蛋白抗体
Phospho-Aurora B(Tyr12)磷酸化有丝分裂激酶B抗体
ARPM1肌动蛋白相关蛋白M1抗体
ABH1ALKB蛋白抗体
ACAA1乙酰辅酶A酰基转移酶1抗体
phospho-beta Actin (Tyr53)磷酸化β-肌动蛋白抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR 抗体
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体
APOD载脂蛋白D抗体
ASIC1/BNaC2/ASIC1A酸敏感离子通道1抗体