荧光定量PCR试剂盒的特征及注意事项
一、荧光定量PCR试剂盒的特征:
1、荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
2、特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增。
3、重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
4、扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
5、所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
二、荧光定量PCR试剂盒的注意事项:
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入),混匀,置于标准温度保存。
2、使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液PW中加入无水乙醇。
3、使用前请先检查平衡液BL、溶液是否出现浑浊,如有混浊现象,可在标准水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
4、注意不要直接接触溶液,使用后应立即盖紧盖子。
5、所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为标准。
6、提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
7、实验前使用平衡液BL处理吸附柱,可以较大限度激活硅基质膜,提高得率。
8、用平衡液BL处理过的柱子当天使用,放置时间过长会影响效果。
总结:荧光定量PCR试剂盒的特征及注意事项,看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说,希望对大家有所帮助。