小鼠纤连蛋白(FN)elisa试剂盒实验操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗体
phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化复制因子2抗体
3-Apr凋亡相关蛋白3抗体
ATG18自噬相关蛋白18抗体
ATG4A自噬相关蛋白4A抗体
APOA4载脂蛋白A4抗体
ALOX1212脂氧合酶抗体
Angiotensin III血管紧张素III抗体
ADCY3腺苷酸环化酶3抗体
Angiomotin血管动蛋白抗体
Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗体
phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失调症蛋白1抗体
ANKRD17锚蛋白重复结构域蛋白17抗体
ALDH1A1胞质乙醛脱氢酶1抗体
ARL3ADP核糖基化样因子ARL3抗体
15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗体
ABC2乳腺癌增强蛋白2抗体
Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗体