很多同学养细胞的手艺,都是从师兄师姐那里「传承」来的,由于没有办法做到绝对的无菌,所以从经验角度出发,前辈们都会告诉刚开始养细胞的同学,可以在配制培养基的时候,加入1%左右的双抗,防止细胞出现细菌污染(有些时候甚至出现离开抗生素,细胞没过几天立马就被污染的情况)。
这就造成一些小伙伴在培养基中「预防性添加抗生素」,其实图的就是个心安,抱着「有了抗生素就不怕污染」的心态。但事实上,抗生素并不是「免死金牌」,真菌、支原体这些污染是它不能够对抗的,甚至滥用还会适得其反。
这抗生素对细胞有什么影响呢?
早在十几年前,就有很多报导指出β-内酰胺类抗生素及氨基糖甙类抗生素,对真核细胞培养有抑制增殖作用[1]。并且这种抑制增殖作用在原代细胞和干细胞等难养细胞上尤其明显[2-3]。2017年,加州大学Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上发表文章,呼吁在细胞培养过程中减少抗生素的使用[4]。他们发现抗生素(双抗:青霉素和链霉素)的使用影响人体肝细胞中基因表达与基因调控。其中有209个基因的表达发生了改变,特别是与药物和应激反应相关的基因。超过9,500个基因调控元件发生了变化,并且很多调节元件位于参与细胞分化,核酸酶活性和tRNA修饰的基因附近。虽然这些基因的数量在庞大的细胞基因库中不值一提,但这绝对不是一个应该被忽略的事件。
虽然抗生素对真核细胞生长的影响机制至今尚未明确,但是为了细胞更好的生长,实验结果更加准确,实验数据更加稳定,在实验过程中尽量不要随意使用。