皮肤黑色素瘤细胞操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

小鼠苗条素(OB)ELISA试剂盒

小鼠苗条素(LEP)ELISA试剂盒

小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA试剂盒

小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒

小鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA试剂盒

小鼠可溶性CD80(sCD80)ELISA试剂盒

小鼠巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒

小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒

小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒

小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA试剂盒

小鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒

小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒