毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。
毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。
类型 缩写 说明
1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液
毛细管等速电泳 CITP 使用两种不同的CZE 缓冲液
毛细管等电聚焦 CIEF 管内装pH 梯度介质,相当于pH 梯度CZE
胶束电动毛细管色谱 MECC 在CZE 缓冲液中加入一种或多种胶束
微乳液毛细管电动色谱 MEEKC 在CZE 缓冲液加入水包油乳液高分子离子交换
毛细管电动色谱 PICEC 在CZE 缓冲液中加入可微观分相的高分子离子
开管毛细管电色谱 OTCEC 使用固定相涂层毛细管,分正、反相于离子交换
亲和毛细管电泳 ACE 在CZE 缓冲液或管内加入亲和作用试剂
非胶毛细管电泳 NGCE 在CZE 缓冲液中加入高分子构成筛分网络
2 单根填充管 毛细管凝胶电泳 CGE 管内填充凝胶介质,用CZE 缓冲液
聚丙烯酰胺 毛细管凝胶电泳 PA- CGE 管内填充聚丙烯酰胺凝胶
琼脂糖毛细管凝胶电泳 Agar- CGE 管内填充琼脂糖凝胶
填充毛细管电色谱 PCCEC 毛细管内填充色谱填料, 分正、反相于离子交换等
3 阵列毛细管电泳 CAE 利用一根以上的毛细管进行CE 操作
4 芯片式毛细管电泳 CCE 利用刻制在载玻片上的毛细通道进行电泳
5 联用 毛细管电泳/质谱 CE/MS 常用电喷雾接口,需挥发性缓冲液
毛细管电泳/核磁共振 CE/NMR 需采用停顿式扫描样品峰的测定方法
毛细管电泳/激光诱导荧光 CE/LIF 具单细胞、单分子分析潜力
毛细管电泳通常使用内径为25-100 μm 的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。标准毛细管的外径为375 μm,有些管的外径为160 μm。毛细管的特点是:容积小(一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL);侧面/截面积比大,因而散热快、可承受高电场(100-1000 V/cm);可使用自由溶液、凝胶等为支持介质;在溶液介质下能产生平面形状的电渗流。有以下特点:
(1) 塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时 ,塔板数目可达107 片/m 以上;
(2) 快速 一般在十几分钟内完成分离;
(3) 微量 进样所需的样品体积为nL 级;
(4) 多模式 可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;
(5) 经济 实验消耗不过几毫升缓冲溶液,维持费用很低;
(6) 自动 CE 是目前自动化程度较高的分离方法。