酶联法检测人类免疫缺陷病毒
[测定方法] ELISA法
[方法学原理] 在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV（1型十Ⅱ型），与样品中抗HIV抗体反应，同时加入HRP标记HIV（1型+Ⅱ型）抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度（OD值）从而判定样品中HIV抗体的存在与否。
[标本准备] 静脉抽血2ml，不抗凝
[试剂]
1．预包被微孔反应板条
2．酶标试剂
3．阴性对照
4．阳性对照
5．洗涤液
6．显色剂A、B
[仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
[测定步骤]
1．将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照2孔，空白1孔。
2．每孔加人酶标试剂100~1，空白孔除外。
3．分别在相应孔中加入待测样品或阴性对照、阳性对照20ul，振荡混匀。37℃环境中温育60min。
4．弃去孔内液体，用洗涤液充分洗涤6遍，zui后一次尽量拍干。
5．每孔加人显色剂A、B液各50u1，轻轻振荡混匀，置37℃环境中避光显色10min。
6．每孔加终止液50gl，轻轻振荡混匀，设定酶标仪波长450nm（建议用双波长检测）测定各孔吸光度。
7．结果判定 样品OD值≥临界值（cut off）者为HIV抗体初筛阳性（注意：初筛阳性标本应重新取样品进行双孔复试，复试阳性者应按“全国HIV检测管理规范”送HIV确认实验室进行确认试验）。样品OD值<临界值（cutoff）者为HIV抗体阴性。
[注意事项]
1．检测单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2．检测必须符合HIV实验室管理规范和生物安全守则的规定，严格防止交叉污染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全地执行消毒隔离制度。所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理，终止液为2mol／L硫酸，使用时必须注意安全。
3．试剂盒从冷藏环境中取出同时应置室温环境中平衡30min后方可使用，未用完的微孔条密封保存。
4．加液时必须用加液器，并经常校对加液器的准确性。
5．洗涤时各孔均需加满洗涤液，防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机洗涤应设定30～60s浸泡时间。
6．HIV抗体检测结果的判定必须以酶标仪读数为准，建议用双波长450／630nm检测。
7．操作应按说明书严格进行，不同批次试剂不得混用。
[临床意义] ELISA法HIVI型+Ⅱ型抗体阳性提示可能为HIV感染，但须经有关部门确认并须结合流行病学史和现病史诊断，同时送有国家认可资格的确认实验室进行确认。