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有血清培养过渡到无血清培养基需要的条件
更新时间:2014-08-13   点击次数:928次

有血清培养过渡到无血清培养基需要的条件

  无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是的,从有血清培养过渡到无血清培养基的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。

  切记,细胞培养基的储存条件是2-8摄氏度。如果细胞培养基不小心被冻,您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。

  贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。

  当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。

  一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

  总之,大部分添加物和试剂zui多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。

100克 Bile powder of cow 培养基牛胆汁粉 BR,40%
100克 Bile powder of pig 猪胆汁粉 BR
250克 OX Bile dihydrate purified 脱氢牛胆粉 BR
250克 Beef extract powder 小牛浸膏粉 BR
500克 Meat extracts beef 牛肉膏 BR
250克 Yeast extract powder 酵母粉 BR
500克
500克 Yeast extract 酵母浸膏 BR
25克 Bile salt No. 3 3号胆盐 BR,90%
25克 Bile salt No. 培养基5 5号胆盐 BR,70%
25克 Bile salt No.7 7号胆盐 BR
25克 Bile salt from sheep 羊胆盐 BR
25克 Bile salt from ox 牛胆盐 BR,60%
1公斤
25克 Bile salt from pig 猪胆盐 BR,65%
1公斤
25克 Bile salt from poultry 禽胆盐 BR
250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
1公斤
100克 Casamino acid 培养基酪蛋白水解物 BR
500克
250克 Casein Hydrolysate 酶水解酪蛋白 BR
1公斤

 

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