生物试剂分析传代培养细胞染色体显示法

1．培养细胞：取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80％～90％汇合单层培养细胞。

2．加秋水仙素：使用zui终浓度为0.02～0.8微克/毫升营养液，温箱继续培养6～10小时；或用低温封闭法：把培养细胞置于4℃条件下6～12小时后，再于37℃温箱继续培养6～10小时处理（加秋水仙素）。

3．采集分裂细胞：可利用分裂中期细胞体变圆与底物附着不牢特点，此时手持培养瓶，左右反复横向水平摇动，令培养液在培养细胞表面反复冲刷。应用此法可使90％的中期分裂细胞从瓶壁脱落，注意勿用力过猛，以防多量非分裂细胞脱落影响观察。

4．离心：收集培养液，1000转/分钟离心5～10分钟。

5．低渗处理：吸除上清液、加入预温至37℃的0.075M KCl溶液，在温箱中静置20～30分钟。

6．预固定：向悬液中加新鲜1：3醋酸、甲醇固定液1ml，用吸管吹打调匀，此措施能起到先使细胞表面轻微固定，可防止固定后细胞粘连成块。

7．固定：离心，同4，吸除上清液，加新鲜固定剂5～10ml；加固定剂时要用一手微斜持离心管，另手用吸管吸取固定剂，把固定剂逐滴滴在离心管壁上，使之慢慢流入离心管中，然后轻轻吹打均匀，置15～20分钟。

8．重复7，末次离心后，小心吸除大部分上清，据悬液中细胞密度大小，余下固定液0.5～1ml。

9．制片：用滴片法制片，按如下步骤：*洗净载物片，勿留任何油脂，置冰箱中储备备用。滴片前现从冰箱中取出冷载物片1片，在载物片表面出现细微水气时，立即向片的一侧滴2～3滴细胞悬液，滴片时的距离能保持半米高度才好。滴片后置室温中令其自然干燥，或用吹风机热风吹干亦可。如此制备好的标本可置盒中备用或立即进行染色观察。

10.染色和封片：一般常用Giemsa染色：取干液Giemsa 1份加pH6.8磷酸缓冲液9份混合，染色10分钟后，水洗、晾干、可直接观察。如标本需要保存或做长时间观察，可过二甲苯两次后，用中性树胶封片后，再过二甲苯，然后封片亦可。

553-24-2    3-butylpyridine    N-甲基野靛碱    
553-21-9    539-44-6    (1R)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-1,5-methano-8H-pyrido[1,2-a][1,5]...    
553-17-3    对甲基苯肼    486-87-3    
553-12-8    p-tolylhydrazine    α-萘乙酸钠    
553-03-7    539-47-9    (+)-alpha-isolupanine    
552-94-3    3-(2-呋喃基)丙烯酸    487-06-9    
552-89-6    Furylacrylic acid    5,7-二甲氧基香豆素    
552-86-3    539-48-0    5,7-Dimethoxycoumarin    
552846-17-0    对苯二甲胺    487-21-8    
552-82-9    alpha,alpha'-diamino-P-xylene    2,4-二氧四氢喋啶    
552-58-9    539-74-2    Lumazine    
552-45-4    3-溴丙酸乙酯    507-28-8    
552-41-0    Ethyl 3-bromopropionate    四苯基氯化砷鎓水合物    
552-38-5    539-82-2    Tetraphenylarsonium chloride    
552331-16-5    戊酸乙酯    507-52-8    
552-32-9    Ethyl n-Valerate    2-三氟甲基-2-丙醇    
552-30-7    539-86-6    1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-ol    
552-22-7    二烯丙基二硫    507-70-0    
552-16-9    Allicin    龙脑    
551-93-9    539-88-8    ((1S)-endo)-(-)-borneol    
551-92-8    乙酰丙酸乙酯    508-02-1    
551-62-2    Ethyl levulinate    齐墩果酸    
551-16-6    539-90-2    oleanolic acid    
551-15-5    丁酸异丁酯    508-75-8    
551-11-1    isobutyl butyrate    铃兰毒甙    
551-06-4    540-07-8    convallatoxin    
550-99-2    己酸戊酯    509-15-9    
550-74-3    amyl caproate    钩吻碱    
550-44-7    540-09-0    gelsemine free base    
550378-78-4    12-二十三酮    509-34-2    
550378-39-7    tricosan-12-one    溶剂红 49    
550378-07-9    540-10-3    3',6'-bis(diethylamino)spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xant...    
550363-85-4    鲸蜡    510-15-6    
550347-54-1    hexadecyl palmitate    乙酯杀螨醇    
549-49-5    540-18-1    Chlorobenzilate    
549-18-8    丁酸戊酯    511-08-0    
548-93-6    amyl butyrate    麦角克碱    
548-83-4    540-23-8    ergocristine    
548-80-1    对甲苯胺,盐酸盐    511-45-5    
548-73-2    p-Toluidine Hydrochloride    二苯哌丙醇