猪丙二醛（MDA）试剂盒使用说明

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T
0.3 nmol/L -8 nmol/L

使用目的：本猪丙二醛MDA试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中丙二醛（MDA）含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪丙二醛（MDA）水平。用纯化的猪丙二醛（MDA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再与HRP标记的丙二醛（MDA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙二醛（MDA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪丙二醛（MDA）浓度。

猪丙二醛MDA试剂盒组成 
1    30倍浓缩洗涤液    20ml×1瓶    7    终止液    6ml×1瓶
2    酶标试剂    6ml×1瓶    8    标准品（16 nmol/L）    0.5ml×1瓶
3    酶标包被板    12孔×8条    9    标准品稀释液    1.5ml×1瓶
4    样品稀释液    6ml×1瓶    10    说明书    1份
5    显色剂A液    6ml×1瓶    11    封板膜    2张  
6    显色剂B液    6ml×1/瓶    12    密封袋    1个

标本要求 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤
1.标准品的稀释：本猪丙二醛MDA试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
8 nmol/L    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
4 nmol/L    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
2 nmol/L    3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
1 nmol/L    2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
0.5 nmol/L    1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。