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ELISA试剂盒特异性显色检测成功实现
更新时间:2014-07-16   点击次数:681次

ELISA试剂盒特异性显色检测成功实现

    在ELISA试剂盒中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步,应引起操作者重视。无论是手工操作还是机器操作,得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关,ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
    每种试剂都有其*反应模式,其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高,反应时间长,会造成整板本底高,阳性率高。温育一般用湿盒或水浴,ELISA试剂盒反应板不宜叠放,以保证各板温度都能迅速平衡,为避免蒸发,板上应加盖。
    作为记录测定结果的仪器,酶标仪的性能稳定与否,决定结果的可靠度。首先酶标仪应定期进行保养,对滤光片要定期校正;其次酶标仪波长设置要正确,使用双波长,一个检测波长,一个参比波长,以消除微孔板底部划痕、不平、指印或液面高度差异造成的光干扰。此外,在用酶标仪读数时先擦试微孔板底部并压平板条。由于各种酶标仪性能有所不同,使用中应详细阅读说明书
    综上所述,尽管目前上以及我国有了部分标准血清或参比血清(血清盘),但是酶联免疫吸附技术目前在技术上尚未做到标准化。受方法学及技术条件的限制,在酶联免疫吸附测定中有时不可避免的会出现一定的非特异性,ELISA试剂盒我们可以通过以上措施把非特异性显色降至zui低限底,从而提高检测的特异性,并得到更准确、可靠的实验结果。

    在基因治疗中,造血干细胞因为具有自我更新及分化为各种细胞系的能力而成为一种很有吸引力的靶细胞。ELISA试剂盒近年来,将外源目的基因导入造血干细胞,以纠正或补偿基因缺陷和异常引起的疾病,特别是血液疾病如腺苷脱氨酶缺陷病、血友病、地中海贫血症及镰状细胞贫血症中已取得重要的进展,然而,在造血干细胞中实现靶向基因组编辑却仍然是一个难题。

    基因治疗为一些因基因缺陷引起的遗传性疾病提供了良好的治疗效果。然而传统的方法是采用一种遗传工程载体将突变基因的一个功能拷贝传送到病变细胞添加到基因组中。ELISA试剂盒尽管更为先进的载体,例如慢病毒载体证实提高了安全性和疗效,利用半随机插入载体存在的插入突变及失控性转基因表达风险仍然令人们感到担忧。这些不良效应有可能会触发癌症形成、毒性作用或破坏基因修饰细胞。

 

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