器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,人ELISA试剂盒ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
试剂
(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml
(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液: 牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 人ELISA试剂盒加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4) 终止液(2M H2SO4): 蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四甲基联苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml 底物缓冲液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液: 人ELISA试剂盒ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl (8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。