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研究证明做Elisa(酶联免疫)时温育操作的重要性
更新时间:2015-04-29   点击次数:794次

温育是ELISA试剂盒测定中影响测定成败zui为关键的一个因素。

温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。zui为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。 温育这一步是临ELISA 测定中zui容易出现问题的步骤。通常目前国内 ELISA 商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时, 则通常为37℃ 1~2小时才能有较*的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。

操作注意事项

1、要保证在设定的温度下有足够的反应时间 一般来说,加完样本和(或)反应试剂后,将 微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有天 室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。

2、温育温度的选择 在有的ELISA试剂盒的说明书中,指出温育温度可有两种,例如,一种是37℃下1h,另一种则为43℃下45min。因此,我们建议在临床 ELISA 测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

3、在实验室的常规测定中,将板从室温(通常在25℃左右)臵于37℃温箱, 板孔升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加。

20mg/支 毛蕊异黄酮苷 Calycosin-7-O-β-D-glucoside 毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷;毛蕊异黄酮葡萄糖苷 20633-67-4
20mg/支 京尼平 Genipin 6902-77-8
10mg/支 黄柏碱 Phellodendrine 6873-13-8
20mg/支 朝藿定A1 Epimedin A1 分子式:C39H50O20 
分子量:838.80
20mg/支 杨梅苷 Myricetrin 杨梅甙; 五羟基黄酮-3-鼠李糖苷 17912-87-7
20mg/支 人参皂苷Ro Ginsenoside Ro 竹节参苷V 34367-04-9
20mg/支 灰毡毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B 136849-88-2
20mg/支 银杏内酯J Ginkgolide J 白果苦内酯J 107438-79-9
20mg/支 特女贞苷 Specnuezhenide 39011-92-2
20mg/支 京尼平苷酸 Geniposidic acid 栀子酸 27741-01-1
20mg/支 川续断皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9
20mg/支 表告依春 Epigoitrin (R)-5-乙烯基-2-恶唑啉硫酮 1072-93-1
20mg/支 大车前苷 Plantamajoside 104777-68-6
20mg/支 8-O-乙酰山栀苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester 57420-46-9
10mg/支 水晶兰苷 Monotropein 水晶兰甙 5945-50-6
20mg/支 黄杞苷 Engeletin 572-31-6
10mg/支 巴豆苷 Crotonoside 异鸟苷 1818-71-9
ELISA试剂盒 10mg/支 沙苑子苷A Complanatoside A 146501-37-3
20mg/支 穗花杉双黄酮 Amentoflavone 阿曼托黄酮 1617-53-4
20mg/支 土荆皮乙酸 Pseudolaric Acid B 土荆乙酸; 土槿皮乙酸 82508-31-4
10mg/支 去甲异波尔定 Norisoboldine 去甲基异波尔定 23599-69-1
20mg/支 盐酸益母草碱 Leonurine hydrochloride 24697-74-3

 

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