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小鼠17羟孕酮(17-OHP)酶联免疫分析试剂盒说明书

简要描述:

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更新时间:2024-08-28;厂商性质:经销商;览量:970

服务:
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产品名称:小鼠17羟孕酮(17-OHP)酶联免疫分析试剂盒说明书
英文名称:Mouse 17 hydroxyprogesterone (17-OHP) ELISA Kit
产品规格:96T/48T(两种规格)
检测方法:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
保存条件:2-8
产品性状:液体盒装
产品价格:含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测。
小鼠17羟孕酮(17-OHP)酶联免疫分析试剂盒说明书技术交流:

双抗体夹心法(检测未知抗原)

间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml4 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml37 孵育0.51小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6
、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml 每孔加0.1ml4过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,37孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3
、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml37孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6
、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

小鼠17羟孕酮(17-OHP)酶联免疫分析试剂盒说明书操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。
4. 配液:将3048T20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水3048T20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3
8. 洗涤:操作同5
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.
10.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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温馨提示:使用前,请*阅读说明书。本酶联免疫试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理,只能用于研究用途,不得用于医学诊断

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