维生素B1测试盒

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维生素B1测试盒测定意义

维生素B1(Vitamin B1)是构成脱羧辅酶的主要成分，参与细胞代谢中的三羧酸循环，是维持机体正常代谢必须的水溶性维生，在生物体能量代谢中有重要的作用。

测定原理

VB1在碱性条件下还原铁化钾生成亚铁化钾，亚铁化钾与Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝，在704nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅、蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

组织L1检测试剂盒 CTSL1/CTSL ELISA Kit

组织H检测试剂盒 CTSH ELISA Kit

组织G自身抗体检测试剂盒 Cath G Ab ELISA Kit

组织C检测试剂盒 CTSC ELISA Kit

组蛋白乙酰化酶检测试剂盒 HAT ELISA Kit

组蛋白脱乙酰化酶2检测试剂盒 HDAC2 ELISA Kit

组蛋白去乙酰化酶检测试剂盒 HDAC ELISA Kit

组蛋白赖氨N-甲基转移酶SETD7检测试剂盒 SETD7 ELISA Kit

组蛋白H3.3检测试剂盒 H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit

总前列腺特异抗原检测试剂盒 tPSA ELISA Kit

自然杀伤细胞检测试剂盒 NK ELISA Kit

自然抗性相关巨噬细胞蛋白2检测试剂盒 NRAMP-2 ELISA Kit

桩蛋白检测试剂盒 Pax ELISA Kit

转移因子检测试剂盒 TF ELISA Kit

转录中介因子1-β检测试剂盒 TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B ELISA Kit
维生素B1测试盒50管/48样氨基肽酶(LAP)测试盒/分光光度法

100管/96样氨基肽酶(LAP)测试盒/微量法

50管/48样磷丙糖异构酶(TPI)测试盒/分光光度法

100T/96S磷丙糖异构酶(TPI)测试盒/微量法

50T/48样磷果糖激酶(PFK)测试盒/紫外比色法

50管/48样磷烯chun式丙酮羧化酶(PEPC)测试盒/分光光度法

100管/96样磷烯chun式丙酮羧化酶(PEPC)测试盒/微量法

50T/48样磷烯chun式丙酮羧化酶(PEPC)测试盒/紫外比色法

50管/48样磷烯chun式丙酮羧激酶(PEPCK)测试盒/分光光度法