NAD苹果酸酶(NADME)测试盒

商品详情：
NAD苹果酸酶(NADME)测试盒测定意义：

ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

测定原理：

NADP-ME催化NADP+还原成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

分离蛋白3ELISA试剂盒 SCRN3免费代测试剂

分离蛋白2ELISA试剂盒 SCRN2免费代测试剂

分离蛋白1ELISA试剂盒 SCRN1免费代测试剂

分拣连接蛋白9ELISA试剂盒 SNX9免费代测试剂

分拣连接蛋白8ELISA试剂盒 SNX8免费代测试剂

分拣连接蛋白7ELISA试剂盒 SNX7免费代测试剂

分拣连接蛋白6ELISA试剂盒 SNX6免费代测试剂

分拣连接蛋白5ELISA试剂盒 SNX5免费代测试剂

分拣连接蛋白4ELISA试剂盒 SNX4免费代测试剂

分拣连接蛋白3ELISA试剂盒 SNX3免费代测试剂

分拣连接蛋白2ELISA试剂盒 SNX2免费代测试剂

分拣连接蛋白19ELISA试剂盒 SNX19免费代测试剂

分拣连接蛋白17ELISA试剂盒 SNX17免费代测试剂

分拣连接蛋白16ELISA试剂盒 SNX16免费代测试剂

分拣连接蛋白15ELISA试剂盒 SNX15免费代测试剂
NAD苹果酸酶(NADME)测试盒土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒/微量法100管/48样

土壤脂肪酶(S-LPS)测试盒/分光光度法50管/48样

土壤脂肪酶(S-LPS)测试盒/微量法100T/96S

土壤植酶测试盒/分光光度法50T/24S

土壤植酶测试盒/微量法100T/48S

土壤中性(S-NPT)测试盒/分光光度法50管/24样

土壤中性(S-NPT)测试盒/微量法100管/48样

土壤中性磷酶(S-NP)测试盒/分光光度法50管/48样

土壤中性磷酶(S-NP)测试盒/微量法100T/96S