转氢酶2测试盒

转氢酶2测试盒

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测定意义：TH位于线粒体的内膜上，又称为线粒体复合体六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化，调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

测定原理：NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+，TH-2催化APAD+还原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，测定375nm光吸收的增加速率，来计算TH-2活性。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

角蛋白19ELISA试剂盒 KRT19免费代测试剂

角蛋白17ELISA试剂盒 KRT17免费代测试剂

角蛋白16ELISA试剂盒 KRT16免费代测试剂

角蛋白15ELISA试剂盒 KRT15免费代测试剂

角蛋白14ELISA试剂盒 KRT14免费代测试剂

角蛋白13ELISA试剂盒 KRT13免费代测试剂

角蛋白12ELISA试剂盒 KRT12免费代测试剂

角蛋白10ELISA试剂盒 KRT10免费代测试剂

焦磷酶2ELISA试剂盒 PPA2免费代测试剂

焦磷酶1ELISA试剂盒 PPA1免费代测试剂

胶质细胞系来源神经营养因子受体α1ELISA试剂盒 GFRα1免费代测试剂

胶质细胞成熟因子γELISA试剂盒 MPFγ免费代测试剂

胶乳素ELISA试剂盒 LXN免费代测试剂

降钙素受体ELISA试剂盒 CTR免费代测试剂

腱调蛋白ELISA试剂盒 TNMD免费代测试剂
转氢酶2测试盒肌激酶(CK)测试盒50管/24样

肌激酶(CK)测试盒/分光光度法50管/48样

肌激酶(CK)测试盒/微量法100T/96S

几丁质酶测试盒/比色法50T/24样

几丁质酶测试盒/分光光度法50管/24样

几丁质酶测试盒/微量法100T/48S

己糖激酶(HK)测试盒/分光光度法50管/48样

己糖激酶(HK)测试盒/微量法100管/96样

己糖激酶(HK)测试盒/紫外法48样
注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。