结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒

商品详情：
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒测定意义

GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。

测定原理

GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP；进一步通过反应体系中添加的酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比，通过340nm下测定NADPH的增加量，可以计算GBSS活性。

需自备的的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

普列克底物蛋白同源物样域家族A成员2ELISA试剂盒 PHLDA2免费代测试剂

普列克底物蛋白2ELISA试剂盒 PLEK2免费代测试剂

普列克底物蛋白ELISA试剂盒 PLEK免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白9ELISA试剂盒 GLUT9免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白8ELISA试剂盒 GLUT8免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白7ELISA试剂盒 GLUT7免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白6ELISA试剂盒 GLUT6免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白5ELISA试剂盒 GLUT5免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白14ELISA试剂盒 GLUT14免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白12ELISA试剂盒 GLUT12免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白11ELISA试剂盒 GLUT11免费代测试剂

葡萄糖转运蛋白10ELISA试剂盒 GLUT10免费代测试剂

葡萄糖磷变位酶5ELISA试剂盒 PGM5免费代测试剂

葡萄糖磷变位酶3ELISA试剂盒 PGM3免费代测试剂

葡萄糖磷变位酶2样蛋白1ELISA试剂盒 PGM2L1免费代测试剂
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒β葡萄糖苷酶（β-GC)/纤维二糖酶测试盒/分光光度法50管/24样

β葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖酶测试盒/微量法100管/48样

β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)测试盒/比色法50管/48样

β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)测试盒/分光光度法50管/48样

β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)测试盒/微量法100管/96样

γ-氨基丁(GABA)测试盒/分光光度法50管/48样

γ-氨基丁(GABA)测试盒/微量法100管/96样

γ-谷氨酰半连接酶(GCL)测试盒/比色法50T/24样

γ谷氨酰半连接酶(GCL)测试盒/分光光度法50管/48样