简要描述:
Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1093
商品详情:
Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒测定意义:Ca++ Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3221 | 100管/48样 | 微量法 |
YSH3221-1 | 50管/24样 | 可见分光光度法 |
测定原理:根据Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
类固醇硫酯酶同工酶SELISA试剂盒 STS免费代测试剂
类固醇合成急性调节蛋白ELISA试剂盒 STAR免费代测试剂
酪蛋白激酶1δELISA试剂盒 CSNK1δ免费代测试剂
转氨酶ELISA试剂盒 TAT免费代测试剂
激酶2ELISA试剂盒 Tyk2免费代测试剂
磺基转移酶2ELISA试剂盒 TPST2免费代测试剂
磺基转移酶1ELISA试剂盒 TPST1免费代测试剂
狼疮脑抗原ELISA试剂盒 LBA1免费代测试剂
兰尼定受体3ELISA试剂盒 RYR3免费代测试剂
赖氨酰氧化酶样蛋白4ELISA试剂盒 LOXL4免费代测试剂
赖氨特异性去甲基化酶4AELISA试剂盒 KDM4A免费代测试剂
醌型二氢蝶啶还原酶ELISA试剂盒 QDPR免费代测试剂
蝰蛇毒素ELISA试剂盒 Viperin免费代测试剂
喹啉磷核糖基转移酶ELISA试剂盒 QPRT免费代测试剂
快肌肌钙蛋白CELISA试剂盒 TNNC2免费代测试剂
Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒脱氢酶(GDH)测试盒/分光光度法50管/48样
脱氢酶(GDH)测试盒/微量法100管/96样
脱氢酶(GLDH/GDH)测试盒/比色法50T/48样
脱羧酶(GAD)测试盒/分光光度法50管/24样
脱羧酶(GAD)测试盒/微量法100管/48样
(GLN)测试盒/比色法100管/48样
合成酶(GS)测试盒/比色法50管/24样
合成酶(GS)测试盒/分光光度法50管/24样
合成酶(GS)测试盒/微量法100管/48样