NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒

NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒

商品详情：
测定意义：

MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布☣杈☣

测定原理：

NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

高迁移率族ATHook蛋白2ELISA试剂盒 HMGA2免费代测试剂

高尔基体蛋白B1ELISA试剂盒 GOLGB1免费代测试剂

高尔基体蛋白A8家族成员AELISA试剂盒 GOLGA8A免费代测试剂

高尔基体蛋白A7ELISA试剂盒 GOLGA7免费代测试剂

高尔基体蛋白A6ELISA试剂盒 GOLGA6免费代测试剂

高尔基体蛋白A5ELISA试剂盒 GOLGA5免费代测试剂

高尔基体蛋白A4ELISA试剂盒 GOLGA4免费代测试剂

高尔基体蛋白A3ELISA试剂盒 GOLGA3免费代测试剂

高尔基体蛋白A2ELISA试剂盒 GOLGA2免费代测试剂

高尔基体蛋白A1ELISA试剂盒 GOLGA1免费代测试剂

高尔基糖蛋白1ELISA试剂盒 GLG1免费代测试剂

高尔基磷蛋白3ELISA试剂盒 GOLPH3免费代测试剂

干扰su调节因子9ELISA试剂盒 IRF9免费代测试剂

干扰su调节因子4ELISA试剂盒 IRF4免费代测试剂

干扰su调节因子1ELISA试剂盒 IRF1免费代测试剂
NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒铜蓝蛋白(CP)测试盒/比色法50管/48样

铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒/分光光度法50管/24样

铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒/微量法100T/48S

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒/分光光度法50管/24样

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒/微量法100管/48样

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α- GC)测试盒/分光光度法50管/24样

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)测试盒/微量法100管/48样

土壤β木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒/分光光度法50管/24样

土壤β木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒/微量法100T/48S
注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。