简要描述:
酰基转移酶(AAT)测试盒是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:1019
商品详情:
酰基转移酶(AAT)测试盒测定意义:
AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3479 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3479-1 | 25管/24样 | 可见分光光度法 |
YSH3479-1 | 50管/48样 | 可见分光光度法 |
测定原理:
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,同时还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412nm吸光度增加速率,来计算AAT活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
心肌肌动蛋白α1ELISA试剂盒 ACTC1免费代测试剂
心肌钙黏蛋白ELISA试剂盒 CDHH免费代测试剂
斜方蛋白1ELISA试剂盒 RHOM1免费代测试剂
小异二聚体伴侣ELISA试剂盒 SHP免费代测试剂
小亚基钙1ELISA试剂盒 CAPNS1免费代测试剂
小细胞蛋白γELISA试剂盒 PARVγ免费代测试剂
小细胞蛋白βELISA试剂盒 PARVβ免费代测试剂
小细胞蛋白αELISA试剂盒 PARVα免费代测试剂
小脑肽4ELISA试剂盒 CBLN4免费代测试剂
小脑肽3ELISA试剂盒 CBLN3免费代测试剂
小脑肽2ELISA试剂盒 CBLN2免费代测试剂
小脑肽1ELISA试剂盒 CBLN1免费代测试剂
小核糖核蛋白多肽CELISA试剂盒 SNRPC免费代测试剂
小根蛋白ELISA试剂盒 ROLT免费代测试剂
小泛素相关修饰蛋白2ELISA试剂盒 SUMO2免费代测试剂
酰基转移酶(AAT)测试盒γ/糖化酶比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样
γ/糖化酶比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法检测试剂盒 微量法100管/96样
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法检测试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法检测试剂盒 紫外分光光度法25管/24样
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法检测试剂盒 微量法100管/96样
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法检测试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法检测试剂盒 紫外分光光度法25管/24样
结合态淀粉合成酶(GBSS)比色法检测试剂盒 微量法100管/96样