简要描述:
蛋白质羰基测试盒是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
更新时间:2024-09-03;厂商性质:经销商;览量:875
商品详情:
蛋白质羰基测试盒测定意义:
蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3278 | 100管/48样 | 微量法 |
YSH3278-1 | 50管/24样 | 紫外分光光度法 |
测定原理:
羰基与2,4-二肼反应生成红色2,4-二腙,在370nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、无水乙醇、乙酸乙酯。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
活化凝ⅫELISA试剂盒 FⅫa免费代测试剂
活化蛋白C抵抗素ELISA试剂盒 APCR免费代测试剂
混合系列蛋白激酶样结构域ELISA试剂盒 MLKL免费代测试剂
混合淋巴细胞反应封闭因子ELISA试剂盒 MLR-Bf免费代测试剂
蛔虫抗体ELISA试剂盒 IgM免费代测试剂
环磷ELISA试剂盒 CTX免费代测试剂
花生四烯5脂氧合酶ELISA试剂盒 ALOX5/LOG5免费代测试剂
花生四烯5脂加氧酶ELISA试剂盒 ALOX-5免费代测试剂
花生四烯15脂加氧酶ELISA试剂盒 ALOX15/LOG15免费代测试剂
琥珀酰合成酶ELISA试剂盒 SCS免费代测试剂
红细胞原卟啉ELISA试剂盒 EP免费代测试剂
红细胞刺激因子ELISA试剂盒 ESF免费代测试剂
亨廷顿相关蛋白1ELISA试剂盒 HAP1免费代测试剂
黑素瘤衍生拉链额外核因子ELISA试剂盒 MLZE免费代测试剂
黑色素细胞刺激素ELISA试剂盒 MSH免费代测试剂
蛋白质羰基测试盒土壤性(SACPT)测试盒100管/48样 微量法
土壤性(SACPT)测试盒50管/24样 可见分光光度法
土壤中性(SNPT)测试盒100管/48样 微量法
土壤中性(SNPT)测试盒50管/24样 可见分光光度法
土壤碱性(SALPT)测试盒100管/48样 微量法
土壤碱性(SALPT)测试盒50管/24样 可见分光光度法
土壤芳基硫酯酶(SASF)测试盒100管/48样 微量法
土壤芳基硫酯酶(SASF)测试盒50管/24样 可见分光光度法
土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶(SNAG)测试盒100管/48样 微量法