磷脂酶A2(PLA2)测试盒

磷脂酶A2(PLA2)测试盒

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测定意义

磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

测定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆(HEPC)产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

旋转蛋白ELISA试剂盒 RTTN免费代测试剂

旋光蛋白ELISA试剂盒 OPTC免费代测试剂

序列相似家族5成员CELISA试剂盒 FAM5C免费代测试剂

序列相似家族20成员AELISA试剂盒 FAM20A免费代测试剂

序列相似家族132成员AELISA试剂盒 FAM132A免费代测试剂

嗅素3ELISA试剂盒 OLFM3免费代测试剂

嗅素2ELISA试剂盒 OLFM2免费代测试剂

嗅素1ELISA试剂盒 OLFM1免费代测试剂

嗅蛋白ELISA试剂盒 Olfactorin免费代测试剂

休眠蛋白ELISA试剂盒 RSN免费代测试剂

雄烯酮ELISA试剂盒 ADT免费代测试剂

雄激素诱导蛋白1ELISA试剂盒 AIG1免费代测试剂

胸腺因子ELISA试剂盒 TF免费代测试剂

β4ELISA试剂盒 Tβ4免费代测试剂

β10ELISA试剂盒 TMSβ10免费代测试剂
磷脂酶A2(PLA2)测试盒肝脂酶（HL）比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样

肝脂酶（HL）比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样

甘油三酯（TG）比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

甘油三酯（TG）比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

总（TC）比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

总（TC）比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

游离（FC）比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

游离（FC）比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

乙酰羧化酶（ACC）比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样
注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。