简要描述:
查尔酮异构酶(CHI)测试盒是第一个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。
更新时间:2024-09-03;厂商性质:经销商;览量:1249
商品详情:
查尔酮异构酶(CHI)测试盒测定意义:
查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3269 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3269-1 | 50管/48样 | 可见分光光度法 |
测定原理:
查尔酮异构酶(CHI)催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮,通过测定381nm下的吸光度变化表示CHI的活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品中AA提取:
1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。
2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
计算公式如下:
1、血清(浆)LAP活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA
2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。
注意事项:
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。
3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4.检出限为100μmol/L。
抗3抗体IgGELISA试剂盒 PR3 Ab-IgG免费代测试剂
抗单链DNAELISA试剂盒 ssDNA免费代测试剂
抗存活素抗体/生存蛋白ELISA试剂盒 Surv免费代测试剂
抗促卵泡素抗体ELISA试剂盒 Anti FSH Ab免费代测试剂
抗丙型肝炎病毒抗体ELISA试剂盒 anti-HCV免费代测试剂
抗斑疹伤寒抗体ELISA试剂盒 anti-typhus-Ab免费代测试剂
抗白色念珠菌ELISA试剂盒 C.albicans免费代测试剂
抗白蛋白抗体ELISA试剂盒 AAA免费代测试剂
抗β2糖蛋白IELISA试剂盒 IgG免费代测试剂
抗α干扰素抗体ELISA试剂盒 IFNα-Ab免费代测试剂
抗α-胞衬蛋白抗体ELISA试剂盒 IgG免费代测试剂
抗UACA抗体ELISA试剂盒 IgG免费代测试剂
抗U1小核核糖核蛋白70kDaELISA试剂盒 SNRNP70免费代测试剂
抗sp100抗体ELISA试剂盒 sp100免费代测试剂
抗Sc1-70抗体ELISA试剂盒 Sc1-70-Ab免费代测试剂
查尔酮异构酶(CHI)测试盒苯胺4羟化酶(AH)测试盒50管/24样 可见分光光度法
N脱甲基酶(ERND)测试盒100管/48样 微量法
N脱甲基酶(ERND)测试盒50管/24样 可见分光光度法
细胞色素b5含量测试盒100管/96样 微量法
细胞色素b5含量测试盒50管/48样 可见分光光度法
血镁浓度测试盒100管/96样 微量法
血磷浓度测试盒100管/96样 微量法
血锌浓度测试盒100管/96样 微量法
血清铁浓度测试盒100管/96样 微量法