简要描述:
3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)测试盒是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
更新时间:2024-09-03;厂商性质:经销商;览量:665
商品属性:
货号 | 规格 | 检测方法 |
YSH3210 | 100管/96样 | 微量法 |
YSH3210 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 |
YSH3210 | 25管/24样 | 紫外分光光度法 |
商品详情:
3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)测试盒测定意义
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
测定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD,340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH活性的高低。
需自备的仪器和用品
分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。
试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到570 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸馏水,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A空白管。显色后务必在30min内测完。
3. 标准管:取EP管,加入10μL标准品,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A标准管。显色后务必在30min内测完。
4. 测定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL试剂二,100μL试剂三和10μL试剂四,混匀后盖紧瓶盖(防止水分散失),置于沸水浴中保温15 min,冷却后反复颠倒EP管数次,于570nm测定吸光值,记为A测定管。显色后务必在30min内测完。
注意:空白管和标准管只需要测定一次。
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