3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒

3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒

商品详情：
测定意义

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶，广泛存在于动植物和微生物体内，催化1，3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸，产生1分子ATP，具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能，广泛应用于药物靶标设计。

测定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

Matrigengel Matrix (Phenol Red Free) (Acro Certified)肿瘤细胞侵袭，血管生成10mL/5mL

低因子Matrigengel Matrix (GFR) (Acro Certified)血管生成10mL/5mL

Matrigengel Matrix (GFR Phenol Red Free) (Acro Certified)类器官培养，血管生成10mL/5mL

高浓度Matrigengel Matrix (HC) (Acro Certified)体内成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC Phenol Red Free) (Acro Certified)体内成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC GFR) (Acro Certified)体内成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC GFR Phenol Red Free) (Acro Certified)体内血管生成10mL/5mL

干细胞培养Matrigengel Matrix IPSC Level (Acro Certified)干细胞培养10mL/5mL

类器官培养Matrigengel Matrix Organoid Culture (Acro Certified)类器官培养10mL/5mL

Human IgG3 Kappa Isotype Control (mAb, carrier free)

Human IgG4 Kappa Isotype Control (mAb, carrier free, MALS verified)

FITC-Labeled Human IgG1 Kappa Isotype Control (FITC, mAb, carrier free)

MouseMouse IgG1 Kappa Isotype Control (mAb, Carrier free, MALS verified)

Biotinylated Mouse IgG1 Isotype Control (Biotin, mAb, carrier free, MALS verified)

NAD苹果酸酶(NADME)测试盒微量法100管/96样

NAD苹果酸酶(NADME)测试盒紫外分光光度法50管/48样

NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒微量法100管/96样

NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒紫外分光光度法50管/48样

NO含量测试盒微量法100管/96样

NO含量测试盒可见分光光度法50管/48样

NO含量测试盒微量法100管/48样

NO含量测试盒可见分光光度法50管/24样

N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)测试盒微量法100管/48样

N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)测试盒可见分光光度法50管/24样

3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒微量法100管/96样

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒紫外分光光度法50管/48样

αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)测试盒微量法100管/48样

αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)测试盒可见分光光度法50管/24样

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。