土壤全磷含量测定

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土壤全磷含量测定测定意义

土壤全磷包括有机磷和无机磷，有机质中的有机磷可受土壤微生物的分解，转化为无机磷，可供植物吸收利用，土壤中磷素营养状况影响作物的产品和质量，而土壤的全磷主要来之土母质和施用的肥料，反映了土壤潜在的供磷能力。

测定原理

混合酸高温消解土壤样品，采用钼锑抗比色法测定样品中的磷含量。

自备实验用品及仪器

消解仪、消化管、天平、烘箱、100目筛、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液管、浓硫酸、高氯酸。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

溶酶体相关膜蛋白2ELISA试剂盒 HLAMP-2免费代测试剂

妊娠相关蛋白AELISA试剂盒 PAPP-A免费代测试剂

妊娠特异性β1糖蛋白4ELISA试剂盒 PSG4免费代测试剂

妊娠特异性β1糖蛋白ELISA试剂盒 SP1/PSβ1-G免费代测试剂

妊娠疱疹抗体ELISA试剂盒 HG免费代测试剂

热休克因子1ELISA试剂盒 HSF-1免费代测试剂

热休克蛋白72ELISA试剂盒 HSP72免费代测试剂

热休克蛋白22ELISA试剂盒 HSP-22免费代测试剂

热休克蛋白20ELISA试剂盒 HSP20免费代测试剂

热稳定抗原ELISA试剂盒 HSA/CD24免费代测试剂

犬尿氨酸ELISA试剂盒 KYN免费代测试剂

醛糖还原酶ELISA试剂盒 AR免费代测试剂

醛缩酶ELISA试剂盒 ALD免费代测试剂

去乙酰化酶Sirtuin-7ELISA试剂盒 SIRT7/SIR2L7免费代测试剂

去乙酰化酶Sirtuin-6ELISA试剂盒 SIRT6/SIR2L6免费代测试剂
土壤全磷含量测定琥珀酸脱氢酶（SDH)测试盒50管/48样 可见分光光度法

丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒100管/96样 微量法

丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒50管/48样 可见分光光度法

线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm)测试盒100管/96样 微量法

线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm)测试盒50管/48样 紫外分光光度法

柠檬酸合酶(CS）测试盒100管/48样 微量法

柠檬酸合酶(CS）测试盒50管/24样 可见分光光度法

柠檬酸合酶(CS）测试盒25管/12样 可见分光光度法

乙酰测试盒100管/96样 微量法