土壤漆酶测试盒

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土壤漆酶测试盒测定意义

漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

测定原理

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、震荡仪。
样品中AA提取：

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

上皮膜抗原ELISA试剂盒 EMA免费代测试剂

伤寒抗原ELISA试剂盒 St-Ag免费代测试剂

伤寒抗体ELISA试剂盒 St-Ab免费代测试剂

伤寒ELISA试剂盒 IgG免费代测试剂

沙眼衣原体抗原ELISA试剂盒 CT免费代测试剂

沙眼衣原体抗体ELISA试剂盒 CT免费代测试剂

沙眼衣原体样活性因子ELISA试剂盒 CPAF免费代测试剂

沙眼衣原体ELISA试剂盒 CT免费代测试剂

沙漠刺猬因子ELISA试剂盒 DHH免费代测试剂

杀伤细胞凝集素样受体ELISA试剂盒 KLR免费代测试剂

杀伤细胞免疫球蛋白样受体ELISA试剂盒 KIR免费代测试剂

杀菌肽BELISA试剂盒 CecB免费代测试剂

杀菌肽ELISA试剂盒 cecropin免费代测试剂

色氨酰tRNA合成酶ELISA试剂盒 WARS免费代测试剂

三角形四肽重复蛋白1ELISA试剂盒 TTC1/TPR1免费代测试剂
土壤漆酶测试盒线粒体呼吸链复合体Ⅱ/琥珀酸辅酶Q还原酶测试盒25管/24样 可见分光光度法

线粒体呼吸链复合体Ⅲ/CoQ还原酶测试盒100管/96样 微量法

线粒体呼吸链复合体Ⅲ/CoQ还原酶测试盒25管/24样 可见分光光度法

线粒体呼吸链复合体Ⅳ/氧化酶测试盒100管/96样 微量法

线粒体呼吸链复合体Ⅳ/氧化酶测试盒25管/24样 可见分光光度法

线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测试盒100管/48样 微量法

线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测试盒25管/12样 可见分光光度法

转氢酶1测试盒100管/96样 微量法

转氢酶1测试盒50管/48样 紫外分光光度法