简要描述:
兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体ELISA试剂盒 Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator
更新时间:2024-08-17;厂商性质:经销商;览量:643
兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体ELISA试剂盒
方法二 用于检测未知抗体的间接法:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。↓ 加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) ↓ 于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。↓ 其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。编辑本段(三)试剂器材1. 试剂 (1)包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml(2)洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml (3)稀释液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。(4)终止液(2M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。(5)底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M柠檬酸(19.2克/L)24.3ml 加蒸馏水50ml。(6)TMB(四甲基联苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml 底物缓冲液(PH5.5)10ml 0.75%H2O2 32μl(7)ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5)1ml 3%H2O2 2μl (8)抗原、抗体和酶标记抗体。(9)正常人血清和阳性对照血清。2.器材:(1)聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。(2)小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。
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