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兔子免疫球蛋白MELISA试剂盒

简要描述:

兔子免疫球蛋白M IgM ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA试剂盒

更新时间:2024-08-17;厂商性质:经销商;览量:603

兔子免疫球蛋白MELISA试剂盒

(1) 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有抗体活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标抗体的使用浓度。   (2) 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:   酶量(mg/ml)=OD403×0.42   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62   对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量,按下列公式计算:   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62   已知酶量和IgG量后,即可计算出标记抗体的摩尔(mol)比值。   HRP/IgG摩尔比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4   结合物中酶总量=HRP(mg/ml)×结合物溶液量   结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×100%   用于ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果较好,达 1000(g/ml时效果。mol.比值由于结合物中含的IgG并不*可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果较好,1.5-2.0时。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%较好,达30%以上时。

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